Calcein, AM 鈣黃綠素（綠色，活細胞熒光探針）
（標簽：超純HPLC≥97%，50μg單支銷售，普遍應用）
|
我們的優勢A： 熒光探針系列產品是我司（懋康生物）重點開發和推廣到市場的產品線，我們不僅意在提供最好最全的熒光探針，讓每位科研者的實驗數據都因“熒光”而美麗起來；而且旨在提供最經濟實惠的熒光探針，價格公道，包裝合理，讓每位科研者的實驗經費不因浪費而流的“灰暗”。 |
|
我們的優勢B： 就Calcein, AM鈣黃綠素（綠色）（CAS：148504-34-1），與市場上幾個品牌相比， 與Invitrogen（Molecular Probe）Calcein, AM, cell-permeant dye（貨號：C3100MP）相比，有特殊包裝20 x 50 μg，但只能整包銷售，金額要4966元。質控純度≥80%（HPLC），具體批次92%左右。 與同仁化學Dojingdo Calcein-AM(C326)相比，只有1mg單個包裝，金額要2480元。質控純度≥90%（HPLC），具體批次純度不確定。 而懋康生物Calcein, AM鈣黃綠素（綠色）（貨號：MX3011）的優勢，有特殊包裝50 μg，且能單只銷售，金額只需280元（限時促銷220元）。質控純度≥97%（HPLC），每個批次都高于97%。而且現貨銷售。 |
產品關鍵詞：
Calcein, AM, Ultra Pure Grade 鈣黃綠素（綠色）；活細胞探針；BCECF-AM；CFDA；碘化丙啶PI；細胞核探針；CAS：148504-34-1；
基本描述：
Calcein, AM，中文名鈣黃綠素乙酰甲酯，CAS NO：148504-34-1，一種具細胞膜滲透性的活細胞熒光染料，呈綠色熒光（Ex/Em= 490nm/515nm）。AM基團的存在不僅加強疏水性，使其能輕易穿透活細胞膜。而且封閉結合鈣離子的分子部分，本身不發熒光。一旦進入細胞后，被細胞內酯酶水解為鈣黃綠素（calcein），能與胞內鈣離子結合，產生強烈的綠色熒光。因不具有細胞膜滲透性，從而被保留在胞內。與其它活細胞染料（如BCECF-AM，CFDA）相比，Calcein, AM最適合用于活細胞染色探針，因細胞毒性很低，而且不會抑制任何細胞功能如增殖或淋巴細胞趨化性。另外，使用Calcein, AM活性檢測的實驗結果十分可信，與標準的51Cr釋放法所得結果一致。
最顯著特征：
只對活細胞進行染色，且細胞毒性極低，結果準確性高，是最適合的活細胞染色探針。
常與死細胞核探針碘化丙啶PI聯合標記，進行活細胞-死細胞的雙重染色實驗?！?/span>見下：活細胞-死細胞雙重染色步驟】
應用圖片：
文獻1：Yoshinori Hiraoka et al. Rapid Assessment of the Physiological Status of the Polychlorinated Biphenyl Degrader Comamonas testosteroni TK102 by Flow Cytometry. Appl Environ Microbiol. 2002 Apr; 68(4): 2031–2035.
圖1：睪丸酮叢毛單胞菌（C. testosteroni）菌株TK102經Calcein, AM，PI雙染后的熒光顯微檢測圖片。（A）活細胞，僅有綠色熒光；（B）死細胞，僅有紅色熒光；（C）透化處理細胞，中心是紅色熒光，外緣是綠色熒光。
文獻2：Mahto SK et al. Microfluidic shear stress-regulated surfactant secretion in alveolar epithelial type II cells in vitro. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2014 Apr 1;306(7):L672-83.
圖2: effects of fluid shear stress on cell viability. MLE-12 (i) and A549 (ii) cells subjected to a maximal flow rate of 100 μl/min for 20 min were tested for viability using fluorescent dyes, calcein acetoxymethyl (AM) in green and propidium iodide in red (see arrows).
產品特性：
1） CAS NO：148504-34-1
2） 同義名：鈣黃綠素乙酰甲酯；3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素，二乙酰甲酯；
3） 分子式：C46H46N2O23
4） 分子量：994.86
5） 純度：≥97%（HPLC）
6） 外觀：白色或淺黃色結晶粉末
7） 溶解性：溶于DMSO（1~5mM）
8） 化學結構式： 
活細胞-死細胞雙重染色步驟：
1. 儲存液制備
1）Calcein, AM——若使用的工作液為2μM，那么可配制2mM的儲存液（1000×），即往50μg Calcein, AM（Mw：994.86）內加入25μl細胞培養級別的DMSO（貨號：MS4601-100mL）即可。-20℃干燥保存。
2）PI——用1ml去離子水溶解1mg PI，制備成1.5mM的儲存液（1mg/ml in H2O）。-20℃干燥保存。
2. 染色工作液制備
取5μlCalcein-AM溶液（2 mM）和15μlPI溶液（1.5 mM）加入5ml 1× PBS或HBSS-Hepes緩沖液，充分混勻。此時得到Calcein-AM的工作液濃度為2μM，PI的工作液濃度為4.5μM?！咀⒁狻浚河捎诓煌毎档淖罴讶旧珬l件不同，初次實驗建議做梯度實驗，以確定Calcein, AM的最佳工作濃度，以最低的探針濃度得到最好的熒光結果為篩選原則。
3. 染色步驟
1）對于貼壁細胞，先用胰酶-EDTA消化細胞，離心收集細胞（1000 rpm，3min）。對于懸浮細胞，直接離心收集細胞。
2）去上清，用PBS（或者其他緩沖液）清洗細胞2~3次，以充分去除殘留的酯酶活性。
3）用1× PBS或HBSS-Hepes緩沖液制備細胞懸液，使其密度為105~106細胞/ml。
4）取100μl染色工作液加入200μl細胞懸液內，混勻，37℃孵育15min?！咀⒁狻浚?/span>如果需要，可延長孵育時間至30min。
5）在蓋玻片上滴加適量染色后的細胞懸液。熒光顯微鏡下使用490±10 nm激發濾片同時檢測活細胞（黃綠色熒光）以及死細胞（紅色熒光）。另外，使用545nm的發射濾片僅能觀察到死細胞。也可以直接在熒光酶標儀下使用合適的濾片進行檢測。
【注意】：熒光顯微鏡下觀察時，如果背景高，可以用培養基清洗掉細胞外的染料后再觀察；Calcein-AM溶液和PI溶液可以混合在一起染色，也可以分開進行染色，加入的先后順序沒有影響。
【注意】：可以使用以下方法來優化得到兩種熒光染料的最佳工作濃度。
1）用0.1%皂素或者0.1-0.5%地高辛孵育細胞10min，或者用70%乙醇孵育細胞30min，從而制備死細胞；
2）用0.1-10μM的PI溶液進行死細胞染色，以得到僅僅對細胞核染色，而不會對細胞質染色的最佳工作濃度。
3）用0.1-10μM的Calcein-AM進行死細胞染色，以得到不會對細胞質染色的最佳工作濃度。然后用此濃度進行活細胞染色，去觀察是否活細胞能被染色。
產品訂購：更大包裝或產品技術問題，請來電/在線咨詢，電話：021-54736159。QQ：2971634497。
|
產品名稱 |
產品編號 |
規格 |
價格（元） |
促銷價（元） |
|
Calcein, AM, Ultra Pure Grade 鈣黃綠素（綠色，超純級別） |
MX3011-50UG |
50μg |
280 |
210 |
|
Calcein, AM, Ultra Pure Grade 鈣黃綠素（綠色，超純級別） |
MX3011-250UG |
5×50μg |
1150 |
920 |
【好消息】：目前最高純度的鈣黃綠素乙酰甲酯（Calcein, AM，HPLC＞97%）限時促銷開始啦，本促銷最終解釋權歸上海懋康生物科技有限公司。本品長時間銷售供貨給國內各大科研機構，以質優價優獲得各老師的青睞。50μg單只特惠包裝，按照5μM的工作濃度，用于96孔板內活細胞檢測（工作體積100μl）可以做100個樣本。單個樣本檢測成本僅2元，非常劃算。
【好消息】：我司（懋康生物）推出鈣黃綠素系列產品，覆蓋幾種熒光光譜，滿足你對活細胞進行多重標記和功能分析的需求。不用再困惑于GFP或FITC等常用熒光素同鈣黃綠素之間的熒光重疊啦。有這么多的選擇，不用煩煩煩啦。
相關產品：更大包裝或產品技術問題，請來電/在線咨詢，電話：021-54736159。QQ：2971634497。
|
貨號 |
名稱 |
規格 |
|
50μg |
||
|
MX3012-500T |
Calcein AM/PI Double Stain Kit 活細胞/死細胞雙染試劑盒 |
500T |
|
1mg |
||
|
MX3014-1MG |
Calcein Deep Red Acetate 鈣黃綠素深紅醋酸鹽 |
1mg |
|
1g |
||
|
MZ8472-154MG |
Probenecid Sodium, Water Soluble 丙磺舒鈉（水溶性） |
2×77mg |
|
10mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
