Aureobasidin A (AbA)金擔子素A/短梗霉素A
——Clontech/Takara 酵母菌/真菌轉化實驗選擇性抗生素/酵母單雜交/雙雜交研究
搜索關鍵詞：選擇性抗生素；酵母菌轉化系統【釀酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌轉化系統【構巢曲霉、黑曲霉】；酵母單雜交/雙雜交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突變基因；
基本描述：
金擔子素A（Aureobasidin A，AbA），也稱為短梗霉素A，一種來源于絲狀真菌Aureobasidium pullulansNo. R106的環酯肽類抗真菌抗生素，在較低濃度（0.1-0.5μg/ml）下即可對酵母菌產生毒性，對該抗生素敏感的真菌包括：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、構巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillusniger.）。金擔子素AbA通過抑制真菌生長所依賴的肌醇磷脂酰神經酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻礙神經酰胺到肌醇磷脂酰神經酰胺的合成，導致鞘脂類物質的合成量不足，細胞膜破裂，進而殺死菌株。研究發現，來自釀酒酵母菌的AUR1和構巢曲霉的AURA基因，兩者具有同源性，都能夠編碼IPC合成酶，對這兩種基因的點突變，也都賦予菌株對AbA產生很強的抗性，比如：突變基因AUR1-C。
AbA用作選擇性標記的應用和優勢：
1. 酵母轉化研究中，金擔子素A（AbA）是一種非常有效的選擇性標志；
2. 使用上基本不需優化條件，且創造極低背景。AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報告子，兼容于攜帶相應抗性的酵母單雜交/雙雜交系統，并提供良好的篩選結果。
攜帶AbA抗性基因（AUR1-C）的商業化載體：
1. 大腸桿菌-酵母菌穿梭載體/大腸桿菌-曲霉穿梭載體（shuttle vector）
簡單描述：pAUR載體系統包含六種大腸桿菌-酵母菌穿梭載體，每一種特別改造用于釀酒酵母、粟酒裂殖酵母或者構巢曲霉，這些載體都涵蓋一個新型的藥物抗性選擇性標志（金擔子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或絲狀真菌具有此抗性。
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載體 |
貨號 |
規格 |
特點 |
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pAUR101 DNA |
3600 |
20μg |
在酵母細胞內不會自主復制，僅通過重組方法整合進入染色體才能保留在細胞內。染色體整合和釀酒酵母菌轉化用載體。含來自釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大腸桿菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR112 DNA |
3601 |
20μg |
含CEN/ARS區域，在酵母細胞內能自主復制，因此細胞分裂過程能保持穩定。含AmpR和URA3基因（尿嘧啶選擇性標記），來自釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大腸桿菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR123 DNA |
3602 |
20μg |
來自釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。蛋白表達載體和來源于pAUR112的大腸桿菌-酵母菌穿梭載體；含用于酵母細胞蛋白表達用的ADH1持續性啟動子； |
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pAUR135 DNA |
3604 |
20μg |
Vector for marker removal in S. cerevisiae；大腸桿菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR224 DNA |
3603 |
20μg |
含來自粟酒裂殖酵母的AbA抗性基因-aur1R；蛋白表達載體，含粟酒裂殖酵母中發揮作用的CMV持續性啟動子； |
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pAUR316 DNA |
3605 |
20μg |
構巢曲霉內能夠自主復制；來自構巢曲霉的AbA抗性基因-aurAr以及AMA1區域（復制起始區）和AmpR；大腸桿菌-曲霉穿梭載體； |
2. 酵母報告基因載體（yeast reporter vector）
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載體名稱 |
特點 |
備注 |
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pAbAi Vector |
用于單雜交（one-hybrid）實驗的酵母報告載體，可用來鑒定和分類DNA結合蛋白。特別設計兼容于Matchmaker Gold酵母單雜交篩選系統，順式作用元件（靶向序列）可插入MCS用作誘餌以篩選GAL4 AD/cDNA融合文庫；目標蛋白-DNA的相互作用驅動AUR1-C抗性基因表達，從而能篩選到AbA抗性酵母； |
Matchmaker Gold酵母單雜交系統 |
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p53-AbAi Vector |
酵母報告載體，配合Matchmaker Gold酵母單雜交篩選系統的陽性對照載體；含p53結合序列（順式作用元件）；AbA抗性基因AUR1-C的表達受GAL4 AD-p53與p53結合序列的相互作用而誘發；p53-AbAi在酵母細胞內不能游離繁殖，僅當整合進入宿主染色體才可以穩定存在，通過載體上的URA3基因和酵母菌株上的非功能ura3-52 locus發生同源重組以實現整合。另，含Col E1復制起始子和AmpR，可實現大腸桿菌內的擴增和復制。 |
基本特性：
1） 同義名：短梗霉素A
3） 分子量：1100Da
4） 純度：≥95%
5） 熔點：155-157℃
6）溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）
產品訂購：更大訂購或產品技術問題，請來電/在線咨詢，電話：021-54736159 。網站：www.worley-valve.com.cn。
或直接參考Clontech官網：http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Aureobasidin?sitex=10022:22372:US
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品牌 |
貨號 |
產品名稱 |
規格 |
價格（元） |
貨期 |
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Clontech |
630466 |
Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies【1mg/ml in methanol特殊包裝，經濟實惠】 |
1mg |
1400 |
現貨 |
相關產品：
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品牌 |
貨號 |
產品名稱 |
規格 |
價格（元） |
貨期 |
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MKbio |
10g |
100 |
現貨 |
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MKbio |
MS0018-25G |
Ampicillin, Sodium Salt 氨芐青霉素鈉 |
25g |
220 |
現貨 |
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MKbio |
MS0018-100G |
Ampicillin, Sodium Salt 氨芐青霉素鈉 |
100g |
750 |
現貨 |
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MKbio |
25mg |
285 |
現貨 |
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MKbio |
MF2003-100MG |
100mg |
800 |
現貨 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
