關鍵詞：
淋巴細胞活化（Lymphocyte Activation），胞內細胞因子表達，流式分析FACS，PKC激活劑 PMA，鈣離子載體，蛋白轉運阻斷劑，CAS：22373-78-0
細胞因子（Cytokines）表達水平高低直接反映細胞在特異性刺激劑（物）下的應答活動，免疫學研究通常使用適當的刺激劑來激活細胞應答，并通過某些藥物如莫能霉素（monensin）或布雷非德菌素A（Brefeldin A，BFA）作用以阻斷胞內高爾基體介導的蛋白轉運，促使細胞因子累積，提高細胞因子的胞內信號，從而能借助流式分選技術（FACS）檢測細胞因子的表達水平。細胞因子表達具有自身的特征性。
常見的蛋白轉運抑制劑：
1、Monensin 莫能霉素，CAS：22373-78-0
簡單描述：天然離子載體(ionophore)，選擇性結合單價陽離子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+，并將這些陽離子轉運到細胞膜內?？善茐母郀柣w，抑制細胞內的蛋白轉運，常用作蛋白轉運抑制劑，用于抑制細胞因子等分泌型蛋白的分泌，使其保留在細胞內。
2、Brefeldin A（BFA，布雷非德菌素A），CAS：20350-15-6
簡單描述：一種常用的蛋白轉運抑制劑，特異性地可逆地阻斷蛋白質從內質網（ER）轉運到高爾基體（Golgi）。經BFA處理，高爾基體很快被破壞并融合到內質網上，該過程呈現能量、溫度和微管依賴性。BFA是一種真菌代謝物，最初曾用作抗病毒試劑，現主要用于研究蛋白轉運。BFA也常被用于抑制細胞因子等蛋白的分泌，并用于增強分泌蛋白的免疫染色檢測。BFA可激活神經鞘磷脂循環（sphingomyelin cycle），還可誘導一些腫瘤細胞發生凋亡。
一些應用實例：
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細胞 因子 |
克隆號 |
靶向細胞 |
刺激物 |
刺激時間 |
蛋白轉運抑制劑 |
表面標志蛋白 |
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IL-2 |
JES6-5H4 |
Splenocytes |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
|
IL-3 |
MP2-8F8 |
Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml)+ soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD4 |
|
GM-CSF |
MP1-22E9 |
Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
|
IFN-γ |
XMG1.2 |
Splenocytes |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
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貨號 |
產品名稱 |
規格 |
價格（元） |
貨期 |
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MZ2101-1ML |
Monensin Solution (1,000×) 莫能霉素溶液（1,000×） |
1ml |
165 |
現貨 |
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MZ2102-100MG |
Monensin, Sodium Salt 莫能霉素（鈉鹽） |
100mg |
460 |
現貨 |
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MZ2103-200UL |
200μl |
245 |
現貨 |
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MZ2103-1000UL |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A |
1ml |
980 |
現貨 |
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MZ2104-5MG |
5mg |
880 |
現貨 |
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MZ2104-25MG |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A（粉末） |
25mg |
3080 |
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100μl |
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25mg |
7150 |
3-4周 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
