MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料（效果同GelRed）
MKRed核酸染料特點
●無毒性：MKRed獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內，艾姆斯氏試驗結果也表明，該染料的誘變性遠遠小于EB。
●靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
●穩定性高：適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定，耐光性強。
●信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。
●操作簡單：與EB一樣，在預制膠和電泳過程中染料不降解；而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
●適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。
●與EB有相同的光譜特性，無需改變濾光片及觀察裝置：標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在300nm紫外光附近可得到最佳激發。但是MKRed不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光完全激發，因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對于此類裝置，我們推薦您使用MKGreen（Cat# 011或012），它和SYBR Green I的光譜相似，靈敏度相當，但更加穩定。
MKRed使用方法簡介
1．膠染法（用法同EB）（推薦方法）
（1）制膠時加入MKRed核酸染料（例如：每50mL瓊脂糖溶液中加入5μL MKRed 10,000×MKRed以此比例類推）。
（2）按照常規方法進行電泳。
注意事項：
? 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊50mL的膠。
? 由于MKRed具有良好的熱穩定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將MKRed儲液加到MKRed和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。MKRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
? 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關，請嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長的凝膠；延長凝膠時間以保證邊緣清晰；改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
? 此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠，對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2．泡染法
（1）按照常規方法進行電泳。
（2）用H2O將MKRed10,000×儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，制成3×染色液。（例如將15μL MKRed10,000×MKRed 1M NaCl加到45mL H2O中）。
（3）將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3×染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5～10％丙烯酰胺的凝膠，染色時間通常介于30min到1h，并隨丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項：
? 用泡染法染色時，染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
? 3× MKRed染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。
幾種核酸染料比較
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名稱 |
靈敏度 |
穩定性 |
對DNA 遷移的影響 |
安全性 |
適用性 |
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MKRed |
高 |
高 |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
· 是一種獨特的油性大分子，不易揮發升華，不易吸入人體，不能穿透細胞膜進入活體細胞內，安全無毒。 · 艾姆斯氏測試結果表明，MKRed在凝膠染色濃度下完全沒有誘變性，因此完全沒有致癌毒性。 |
通用大小片段電泳染色，與EB有相同的光譜特性，無需改變濾光片及觀察裝置。標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用，使用普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在300nm紫外光附近可得到最佳激發。 |
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MKGreen |
高 |
高 |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
① 是一種獨特的油性大分子，不易揮發升華，不易吸入人體，不能穿透細胞膜進入活體細胞內，安全無毒。 |
通用大小片段電泳染色，適用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
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SYBR Green I |
高 |
低 |
染料濃度較高時，條帶容易彎曲，DNA片段遷移的現象明顯 |
屬花箐染料，能透過細胞膜進入活體細胞內，但容易生物降解，不會在體內殘留，安全無毒。 |
100bp以上電泳染色，適用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
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EB |
低 |
高 |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
① 分子量小，易揮發升華，易吸入人體，不易生物降解，在體內長期殘留。 |
100bp以上電泳染色，背景熒光信號高；使用普通紫外凝膠透射儀觀察。 |
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Goldview |
低 |
高 |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
① 主要成分為吖啶橙，是一種煤焦油提取物，具有高毒，致癌，高誘變性。 |
100bp以上電泳染色，背景熒光信號高；適用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
特別提醒：
? 如果您使用的是紫外成像儀，請選擇MKRed；如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測，請選擇MKGreen。
? 在極少數情況下，質粒經某些酶切后的DNA樣品會出現拖尾和分辨率降低，此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
訂購信息：
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品名 |
產地 |
貨號 |
規格 |
單價 |
備注 |
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MKRed（10,000×水溶液） |
MKbio |
MF0754-500UL |
500ul |
460 |
現貨 |
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