目錄號 | MX4037-5MG | 售價 | 1588.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
規格 | 5mg | 運輸溫度 | 冰袋運輸 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名稱 | 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'- Tetramethylindodicarbocyanine-5,5'-Disulfonic Acid | 保存溫度 | -20ºC干燥避光保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS號 | N/A | 有效期 | 至少一年 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
應用 | 細胞膜橙紅色探針 | 訂購數量 |
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產品簡介: DiIC18(5)-DS 細胞膜橙色熒光探針
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訂購信息:
【關聯提示】: DiIC18(5)-DS是DiD(DiIC18(5), MX4004)的磺酸化衍生物,具有更好的水溶性,且在固定和透化處理后能維持良好的染色狀態。
產品描述: DiIC18(5)-DS是紅色熒光和親脂性碳菁類染料-DiD(DiIC18(5))的類似物,英文全名:1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'- Tetramethylindodicarbocyanine-5,5'-Disulfonic Acid,包含磺酸基團以改進探針的水溶性。在水中呈弱熒光,插入膜內則呈強熒光且相當穩定。在脂質環境內具極其高的摩爾吸光系數和短的激發態壽命(~1ns)。一旦進入細胞后,在細胞內質膜中逐步擴散,于最佳濃度條件下可將整個細胞均勻染色。
基本特性:
同義名:1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'- Tetramethylindodicarbocyanine-5,5'-Disulfonic Acid細胞膜紅色熒光探針
CAS NO.:N/A
推薦濾光器:Omega-XF47, Chroma-31023
分子量:1019.57g/mol
保存:-20oC干燥避光保存,有效期至少一年。 運輸:室溫運輸。
注意事項 1)熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法 【注意】以下使用方法僅用作參考,可根據具體的實驗條件做出調整。 1. 染色液制備 1)儲存液制備:用DMSO配置濃度1~5 mM的儲存液。例如,取5mgDiIC18(3)-DS(Mw:993.53g/mol)溶于1ml無水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的儲存液?!咀⒁狻课词褂玫膬Υ嬉焊鶕未斡昧糠盅b儲存在-20℃,避免反復凍融。 2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,調整到1~5 μM的工作濃度?!咀⒁狻抗ぷ饕鹤罱K濃度需要根據不同細胞系和實驗體系來優化。建議從推薦濃度開始,以10倍范圍為區間進行最優濃度的摸索。
2.懸浮細胞染色 1)加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。 2)37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞最佳培養時間不同??梢?0min作為起始孵育時間,之后優化以保證得到均一化的標記結果。 3)孵育結束,按1000~1500 rpm離心5min。 4)去除上清液,之后輕柔加入37℃預熱的生長培養液重懸細胞。 5)再重復3),4)步驟兩次。
3.貼壁細胞染色 1)將貼壁細胞培養于無菌蓋玻片上。 2)從培養基中移走蓋玻片,濾掉過量培養液,將蓋玻片放在潮濕的小室內。 3)在蓋玻片的一角加入100μL的染色工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。 4)37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞最佳培養時間不同??梢?0min作為起始孵育時間,之后優化以保證得到均一化的標記結果。 5)吸掉染色工作液,用培養液洗蓋玻片2~3次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,孵育5~10min,然后吸走培養基。
4.顯微鏡檢測 1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見下表:
2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設定: a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004; b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007; c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005;
5.流式細胞儀檢測 經DiO,DiI,DiD和DiR染色的細胞分別用流式細胞儀的FL1,FL2,FL3或FL4通道檢測。
注意事項 1)經碳菁類染料(比如DiR)染色后的細胞能用多聚甲醛(PFA)固定,但不能用甲醇或其他溶劑的固定劑。染色能承受0.1% Triton X-100或0.1%毛地黃皂苷的透化處理,但會明顯增強胞內染色。 2)經碳菁類染料(比如DiR)染色后的細胞不建議使用封片劑,因封片劑內的甘油或有機溶劑會溶解染料,引起增加的胞內染色和隨時間增加的高背景。建議直接在PBS或其他生理緩沖液內成像。使用PBS直接蓋上蓋玻片,然后四周用指甲油密封。 3)熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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——Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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