ER-Tracker Green, for live-cell imaging 內質網綠色熒光探針

點擊丨商城購買 積分領好禮

產品標簽

ER-Tracker Green; ER-Tracker Blue-White DPX；BODIPY? FL Glibenclamide；格列本脲；DiOC6(3)；CAS: 53213-82-4；

產品信息

【溫馨提示1】：見我司懋康生物整理得溶酶體熒光探針（Lysotracker and Lysosensor）產品專題。

【溫馨提示2】：見我司懋康生物整理得線粒體熒光探針（Mitotracker）產品專題。

產品描述

ER-Tracker dyes是一系列細胞膜滲透性的活細胞染料，高度選擇性結合內質網（ER）。不同于傳統的內質網染料DiOC6(3)，該系列染料極少染色線粒體，且低濃度下染色無細胞毒性。使用提供的優化步驟對細胞染色和甲醛處理后，可以保留部分的活細胞染色特征。

ER-Tracker Green是一種藥物熒光偶聯物，即BODIPY? FL標記的格列苯脲（BODIPY? FL Glibenclamide）。格列本脲，又名優降糖（Glyburide），是一種磺酰脲類口服降糖藥，用來調查胰島素β細胞活性和胰島素分泌，以及研究心肌細胞功能和心律失常。格列本脲能夠結合內質網上突出的ATP敏感性鉀通道（KATP）的磺脲類受體。格列本脲的藥理學活性可能影響內質網功能。某些特定細胞上磺脲類受體的可變表達可能引起非內質網標記。BODIPY? FL是Invitrogen (Molecular Probe)公司開發的BODIPY?熒光染料之一，最大激發/發射波長~504/511nm，光譜特性類似于傳統的FITC，與檢測該染料的標準濾片兼容。

本品為DMSO儲存液，濃度為1mM。用于活細胞內質網染色，建議工作濃度約為1μM，需根據實際情況做優化調整。按照說明書的標準步驟操作，活細胞染色后用甲醛等固定可保留部分染色效果。

產品特性

1）   分子式：C37H42BClF2N6O6S

2）   分子量：783.0952

3）   外觀：液體

4）   Ex/Em：504/511nm (in methanol)

5）   檢測濾片：FITC

6）   化學結構式：

保存與運輸方法

保存：≤-20oC避光干燥保存，至少6個月有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1）   整個染色過程中需注意避光。

2）   ER-Tracker Green（1mM）在4℃，冰浴等較低溫度下會凝固而粘附在離心管官底、管壁或管蓋內，可將置于25℃水浴溫育片刻直至全部融解后使用。對于微量液體，每次使用前低速離心使得液體全部沉降至管底，再開蓋使用。

3）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

以下實驗方案是根據牛肺動脈內皮細胞（BPAE）優化所得，且已驗證適用于其他常規細胞系的染色。建議以下步驟僅作起始實驗的參考，請根據具體的細胞類型和實際情況來優化標記條件。

1.      試劑準備

ER-Tracker Green以1mM的DMSO儲存液形式提供，使用前請將ER-Tracker Green 從冰箱內取出，確?；販刂潦覝鼗蛴?5℃水浴溫育直至完全融解，經短暫離心將所有溶液沉到管底。第一次使用將儲存液根據單次用量分裝，≤-20oC避光干燥保存。

2.      細胞染色

2.1    制備染色工作液：將1mM ER-Tracker Green稀釋至工作濃度，建議工作濃度~1μM。為了最小化染料過高引起的假象，建議使用能達到實驗目的的最低濃度來完成染色?！咀⒁狻浚涸诤珻a2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡鹽溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）內進行染色可得到最佳結果。

2.2    細胞染色：對于貼壁細胞，吸除培養基，用HBSS清洗細胞，加入預熱的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探針的新鮮培養基，并在熒光顯微鏡下觀察細胞。如果細胞需要固定，請跳轉到步驟3。

3.      細胞固定【選做，固定只能保留部分熒光信號】

3.1    固定細胞：用4%甲醛于37℃固定細胞2min。

3.2    清洗和觀察細胞：固定后，用合適緩沖液清洗2次，每次5min。之后可進一步染色或滴加抗熒光淬滅劑封片后觀察。不建議進行透化處理，因用Triton X-100做透化處理會導致熒光信號消失。

染色示例

Fig 1.Live bovine pulmonary artery endothelial cells labeled with ER-Tracker Green and MitoTracker Red 

CMXRos.Organelle staining of live bovine pulmonary artery endothelial cells. Endoplasmic reticulum was labeled with ER-Tracker Green; mitochondria were visualized with MitoTracker Red CMXRos 

相關產品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。