5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

產品標簽

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA)，Counter-selection agent 負選擇（反選擇），Yeast two-hybrid system 酵母雙雜交系統，YNB 酵母氮源基礎，CAS：703-95-7

產品信息

【溫馨提示】：見我司整理的酵母雙雜交（Yeast two-hybrid assay）檢測產品專題。

產品描述

5-氟乳清酸（5-Fluoroorotic Acid，5-FOA）用于酵母負選擇是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質粒清除、質粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會用到5-FOA。5-FOA自身對酵母細胞無毒，但功能型URA3基因能編碼表達乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶（OMP脫羧酶），將其轉化為有毒形式（如5-氟尿嘧啶），從而使得酵母細胞無法生長。因此，在添加尿嘧啶的5-FOA培養基中，攜帶URA3突變基因的酵母菌能正常生長。5-FOA主要用于釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae（URA3）的鑒定和篩選，雖然曾用于其他菌株，包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe（URA4 and URA5），白色念珠菌Candida albicans（URA3）和大腸桿菌E. coli（pyrF）。酵母雙雜交系統中5-FOA的使用允許構建激活結構域雜交文庫來鑒定蛋白-蛋白相互作用。

產品特性

1）CAS NO：703-95-7

2）同義名：5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid;

3）分子式：C5H3FN2O4

4）分子量：174.10 g/mol

5）純度：>99%

6）外觀：類白色至淡黃色粉末

7）熔點：~258°C（高溫非常穩定，如煮沸和高壓滅菌）

8）溶解性：溶于DMSO，微溶于水，乙醇，甲醇

9）化學結構：

保存與運輸方法

保存：-20℃干燥保存，2年有效。

運輸：冰袋運輸。

使用方法

一、5-FOA培養基配置方法（以粉末形式）

1.1 配制400ml標準的酵母合成培養基，并加入1g 5-FOA（#MF2521）粉末，充分溶解混勻，0.22μm濾膜過濾除菌?！净蛘呖僧敻邏簻缇臉藴逝囵B基冷卻到55oC后再加入1g 5-FOA粉末，然后過濾除菌?！?/span>

1.2 高壓滅菌瓊脂粉/水混合液（濃度為20g/600ml），使其冷卻到55oC。

1.3 將溫熱的5-FOA培養液倒入瓊脂粉/水溶液內，攪勻后，倒平板。

二、5-FOA培養基配置方法（以儲存液形式）

2.1 取100mg 5-FOA凍干粉，用1ml無水DMSO充分溶解，配制成100mg/ml（100×）的儲存液。短期頻繁使用，置于4oC避光保存；長期保存，根據單次用量分裝凍存，-20oC保存6個月有效。

2.2 根據實驗室認可的方法，配制標準的酵母合成培養基（含瓊脂粉），高壓滅菌。放入轉子一起滅菌以便后續攪勻組分用。

2.3 冷卻到55oC后加入任何熱敏感組分（氨基酸，糖類或者其他成分）。

2.4 每升培養基加10ml100× 5-FOA儲存液，混勻后，倒平板。

注意事項

1）5-FOA微溶于水，粉末溶解過程中可加熱（如55-65oC）助溶30min~1h直至完全溶解。5-FOA極易溶于DMSO，但高濃度DMSO對細胞有毒，需注意控制DMSO的終濃度。

2）5-FOA培養基不用調節pH。

3）5-FOA培養基平板置于4oC避光保存，可存放3個月，建議用封口膜封口四周

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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