5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷

產品標簽

EdU 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷；BrdU 5-溴-2’-脫氧尿苷；Alexa Fluor 488 azide；Anti-BrdU antibody（DSHB，G3G4）；Cell Proliferation 細胞增殖檢測；CAS NO:61135-33-9；

產品信息

產品描述

EdU，英文全稱5-Ethynyl-2'-deoxyuridine，中文全稱5-乙炔基-2’-脫氧尿苷，是BrdU（5-溴-2’-脫氧尿苷）的新型替代物，可直接檢測活躍的DNA合成或細胞周期的S期合成。作為胸苷的核苷類似物，可插入細胞培養物或動物體內處于活躍合成期的細胞DNA，無明顯毒性。EdU的檢測基于高效的點擊化學反應（click reaction），是由I價銅離子催化的疊氮化物和炔烴化合物之間的反應過程。EdU含有炔烴基，可與含疊氮基團的熒光探針反應形成穩定的三唑環。

借EdU的點擊反應進行DNA檢測的優勢是非常顯而易見的。含疊氮基團熒光探針的小分子量使得EdU能在溫和條件插入DNA，這相反于BrdU為基礎的反應，后者需要DNA變性（通常使用HCl，加熱或DNase消化）促使BrdU暴露，從而被抗BrdU抗體檢測到。因此，少了變性步驟的EdU反應流程快鍵方便，可得到高重復性的結果，并且能輕易的與相關抗體檢測靶標包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白cyclin B1等進行多重分析，通過流式細胞儀、熒光顯微鏡或高通量成像儀（HCS）來檢測。

產品特性

1）CAS NO：61135-33-9

2）同義名：2'-deoxy-5-ethynyl-uridine2’-脫氧-5-乙炔基-尿苷, 2'-deoxy-5-Ethynyluridine, 5-EdU,EdU

3）分子式：C11H12N2O5

4）分子量：252.23 g/mol

5）純度：≥98% (HPLC)

6）外觀：白色至類白色固體

7）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），無水乙醇（~25mg/ml），PBS, pH 7.2（~10 mg/ml）

8）化學結構：

保存與運輸方法

保存：-20°C干燥保存，至少2年有效。

運輸：冰袋運輸。

常見問題（FAQs）

1. 是否任何細胞型都能插入EdU？

答：不是。細胞必須含嘧啶核苷酸補救合成途徑（pyrimidine salvage pathway），沒有該途徑，EdU不能被磷酸化進而不能插入復制中的DNA。

2. EdU儲存液如何制備？

答：體外細胞實驗，取適量EdU（Mw：252.23）溶于DMSO或生理緩沖液配制10mM母液，按單次用量分裝，置于≤-20°C凍存，1年穩定。

3. 如何進行EdU標記？

起始實驗建議測試一系列EdU濃度來確定最佳濃度。如果目前有進行基于BrdU的標記實驗，可選擇相似的濃度和標記時間作為起始EdU標記條件。更低量的EdU可能達到同BrdU的標記效果，最優濃度根據標記時間有所變化，原則上濃度越低，標記時間越長。

對于細胞培養物——哺乳動物和植物細胞用0.1–10 μM EdU孵育0.5-3h能達到相對理想的標記；

對于活體動物——根據注射方式、給藥次數和檢測位置有所變化。參考相應文獻進行優化調整。

4. 如何進行EdU檢測？

使用含疊氮基團的熒光探針如TAMRA azide，Alexa Fluor azide（包括Alexa fluor 488, 555, 594, 647）等，在含有CuSO4的染色反應液中進行熒光染色?；蛘咧苯邮褂梦宜咎峁┑?/span>EdU增殖檢測試劑盒（成像或流式檢測），含有所有檢測組分，使用方便。

注意事項

1）EdU是一種能插入DNA的核苷類似物，操作過程一定要注意防護，不要與皮膚直接接觸。另需戴口罩避免粉塵吸入。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。