| 目錄號 | MX0910-2ML | 售價 | 450.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 規格 | 2ml(10mg) | 運輸溫度 | 冰袋 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名稱 | Type I Collagen, rat tai | 保存溫度 | 2-8℃保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS號 | 9007-34-5 | 有效期 | 1年 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 應用 | 包被基質 | 訂購數量 |
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產品簡介: Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I
搜索關鍵詞： Extracellular Matrix (ECM) 細胞外基質；Gelatin 明膠；Collagen Type I 膠原蛋白I型；Poly-L-lysine 多聚L-賴氨酸；Fibronectin 纖連蛋白；Matrigel 基質膠；CAS：9007-34-5；
產品信息：
基本介紹： 膠原蛋白是結締組織和內臟器官細胞外基質的主要構造成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布最為廣泛。從遺傳和結構上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I（Collagen, Type I）是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體，在37℃，中性pH下自發形成三螺旋骨架，是一種優秀的細胞培養用基質，廣泛用于肝細胞、成纖維細胞、脊神經節、肌肉細胞、施萬細胞、胚肺細胞、上皮細胞和其他大量細胞系。還能用于研究細胞生長、分化、遷移以及發育過程中的組織形態發生。
懋康生物提供的鼠尾膠原蛋白I是根據Birkedal-Hansen方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備?？捎糜诎患毎囵B器皿，培養細胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養器皿表面不易貼壁的細胞，比如成纖維細胞、肝細胞等原代細胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實的生長環境，使得細胞在三維環境中生長。
本品為溶于6mM HAc的無菌溶液，濃度5mg/ml，每個批次產品皆通過細胞培養測試（包括三維空間培養）以保證質量的可靠性。
保存與運輸方法： 保存：2-8℃保存，不可凍存，一年有效。 運輸：冰袋運輸。
注意事項 1）整個操作請于冰上進行，因室溫鼠尾膠原I可迅速成膠，操作過程盡量保持低溫。 2）整個操作請在無菌環境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長。 3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法 1. 細胞培養器皿的表面包被 組織培養器皿的表面包被推薦濃度為1-5μg/cm2，起始濃度可首選5μg/cm2。建議根據具體細胞類型來優化。 1.1 6mM HAc稀釋液的制備 本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的無菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建議用6mM HAc溶液做進一步稀釋。 配制方法：取34.5μl冰醋酸（17.4 M）加入100ml雙蒸水，充分混勻后即得到6mM HAc溶液，0.22μm濾膜過濾除菌后待用。
1.2 包被步驟 a，根據自身實驗體系以及優化后的包被濃度來計算所需的膠原蛋白量，并加入相應孔內，確保膠原蛋白溶液完全覆蓋表面。 1）以包被濃度為5μg/cm2，先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白（5mg/ml）稀釋到合適的中間濃度，如50μg/ml，然后參考表1不同培養皿內膠原蛋白加量表來加量到各孔內； 2）以包被濃度為2μg/cm2，先用6mM HAc稀釋液將膠原蛋白（5mg/ml）稀釋到合適的中間濃度，如12μg/ml，然后參考表1不同培養皿內膠原蛋白加量表來加量到各孔內； 表1 不同培養皿內膠原蛋白加量表
b，室溫孵育1h，小心吸掉多余液體，用無菌PBS清洗3~4次后直接使用?；蛘呒油昴z原蛋白溶液后，在超凈臺內開蓋過夜晾干。無菌條件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3個月。
2. 三維膠原的制備 當鼠尾膠原蛋白I使用濃度>1mg/ml，pH 7.0左右皆可形成具有一定強度的三維膠，建議成膠濃度為1-2 mg/ml。 由于本品是以溶于6mM HAc的無菌溶液形式提供，在成膠過程需先加入0.06倍體積的0.1M NaOH中和。
2.1 需要溶液準備（無菌、預冷） 10×PBS（可含酚紅）或10×細胞培養液 0.1M NaOH 雙蒸水
2.2 三維膠原制備（不含細胞）（以配制1ml，1mg/ml三維膠為例）： a，取200μl膠原蛋白（5mg/ml）加到置于冰浴的離心管內，加入690μl無菌水。之后加到12μl 0.1M NaOH【注意：該步驟不能反，如果反過來把12μl 0.1M NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結】，立即混勻。再加入100μl 10×PBS或10×細胞培養液，混勻后立即加到培養器皿中【注意：混勻后pH為7.0左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試】。 b，將培養器皿在室溫（25℃左右）放置20min待膠凝固后，轉移到培養箱內?！咀⒁狻浚?/span>如果配制中使用的是10×PBS，需要在做細胞培養前，先加入適當體積的細胞培養液預平衡。
2.3 三維膠原制備（含細胞）（以配制1ml，1mg/ml三維膠為例）： a，準備好細胞懸液，并放置于冰浴中。 b，將200μl膠原蛋白（5mg/ml）加到12μl 0.1M NaOH【注意：該步驟不能反，如果反過來把12μl 0.1M NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結】，立即混勻。再加入23μl 10×PBS或者10×細胞培養液，立即混勻【注意：混勻后pH為7.0左右，如果PBS或培養液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試】。再加入760μl的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養器皿中。 c，將培養器皿在室溫（25℃左右）放置20min待膠凝固后，加入適當體積細胞培養液，轉移到培養箱中培養。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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