目錄號 | MF0401-15KU | 售價 | 380.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
規格 | 15KU | 運輸溫度 | 冰袋運輸 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名稱 | Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶 | 保存溫度 | -20℃干燥凍存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS號 | 9003-98-9 | 有效期 | 3年 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
應用 | 去除蛋白或RNA樣品中的DNA | 訂購數量 |
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產品簡介: Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas 脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺
關鍵詞: Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9
產品描述 脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多數細胞和組織中都能發現的一種核酸內切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產生5’端為磷酸基團、3’端為羥基的多聚核苷酸,平均消化產物最小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下,DNase I可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點;而在Mn2+存在條件下,DNase I識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。DNase I可水解多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白影響)。
脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,最早從胰腺中分離而來,至今哺乳動物胰腺也是最主要的來源之一。DNase I以兩對二硫鍵結合的多種糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。
本品來自牛胰腺,色譜純化制備,常用于去除蛋白或RNA樣品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使標記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應,比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。
產品特性 1)CAS NO:9003-98-9 2)蛋白純度:≥80%(biuret),色譜純化 3)活力:≥2000Kunit Units/mg 4)活力定義:25℃,pH5.0條件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個酶活力單位(Kunitz unit)。 5)激活劑:多種二價金屬離子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+ 6)抑制劑:β-巰基乙醇;螯合劑;SDS;肌動蛋白;并沒有特異性抑制DNase I酶活的通用抑制劑,比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影響Mn2+激活的DNase I。 7)溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),無色透明溶液
保存與運輸方法 保存:凍干粉-20℃干燥凍存,至少3年穩定。 運輸:冰袋運輸。
常見問題 1、如何溶解DNase I粉末? 將本品溶解于0.15 M NaCl溶液,可配置成5-10 mg/ml的儲存液,-20℃分裝凍存。需要注意:本品儲存液即使-20℃分裝凍存,一周可能會有<10%活力損失;置于2-8℃,約會有20%活力損失。
2、如何將本品活力換算成質量? 根據本品各批次的比活力和蛋白含量,比如當酶比活力為2000 Kunits/mg,蛋白含量為100%(biuret)也,那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。
3、使用多大濃度DNase I用來去除溶液內的DNA? 在含50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2的溶液體系內,加入20-50μg DNase I,并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量僅作參考,具體實驗請做適當調整。
訂購信息【現貨供應】
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注意事項 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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