High Sensitivity Rabbit IHC Kit

高靈敏度免疫組化試劑盒（兔一抗來源）

產品特點：

類似于Vector Lab的VECTASTAIN ABC kit，使用Biotin/Avidin/Biotin+DAB顯色系統，適用于廣譜的免疫組化檢測。

產品信息

 【溫馨提示】：原SP法（streptavidin/biotin-HRP）檢測系統不再供應，現在更換為ABC法（Biton/avidin/biotin-HRP）檢測系統，具高靈敏度，高特異性，高清晰和低背景的特點。

產品描述

免疫組化試劑盒（兔一抗來源）（Rabbit IHC Kit）是一款特異性檢測一抗來源為兔單克隆或多克隆的免疫組化試劑盒，檢測原理基于高靈敏度、高特異性和高清晰的生物素-親和素-生物素信號放大系統，以及辣根過氧化物酶催化底物DAB顯色，從而識別目標抗原的過程。本品適用于石蠟切片、冰凍切片、細胞涂片以及血液標本。

產品組成

保存與運輸方法

保存：2-8℃保存，1年有效，不可凍存。其中，組分E+F需避光保存。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1）   建議檢測目的標本的同時，設置陰性對照和陽性對照。

2）   DAB具潛在致癌性，操作時注意防護，避免直接接觸皮膚。

3）   DAB工作液需現配現用，避光放置，需在30min內完成染色。

4）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

用戶自行準備試劑

操作方法

一、工作液的準備

1.1   封閉血清工作液：取30μl組分A（封閉血清）加入2ml緩沖液中，混合均勻。

1.2   二抗工作液：取30μl組分A（封閉血清）加入2ml緩沖液中，再加入10μl組分B（生物素化山羊抗兔IgG）混合均勻。

1.3   ABC工作液：取20μl組分C（親和素）加入1ml緩沖液中，再加入20μl組分D（生物素化辣根過氧化物酶），立即混合，使用前靜置15~30min。

1.4   DAB底物工作液：取30μl組分E（DAB顯色濃縮液）滴加到1ml組分F（DAB底物稀釋液）中，使用前充分混合，現配現用。

【注意】：

j 請根據需要染色的切片數量按比例配制工作液；

k緩沖液推薦用10mM含0.9% NaCl的磷酸鈉鹽緩沖液（PBS, pH 7.5），緩沖液內不可加入NaN3。

二、染色步驟（以切片為例）

2.1    石蠟切片用二甲苯或其他透明劑及梯度乙醇進行脫蠟和水化。

冷凍切片或細胞樣本，如有必要，可以用丙酮或其他適當固定劑固定抗原。

以上步驟完成后，用水清洗切片5min。

2.2    如果有需要，可進行抗原修復和封閉內源性過氧化物酶的步驟。

2.3    上述步驟完成后，用緩沖液清洗切片5min。

2.4    滴加100μl或適量的封閉血清工作液，室溫孵育20min。

2.5    去除切片上多余的封閉血清。

2.6    滴加100μl或適量的一抗工作液，孵育30min。

2.7    用緩沖液清洗5min。

2.8    滴加100μl或適量的二抗工作液，孵育30min。

2.9    用緩沖液清洗5min。

2.10 滴加100μl或適量的ABC工作液，孵育30min。

2.11 用緩沖液沖洗5min。

2.12 加入適量新鮮配制的DAB底物工作液，室溫孵育2~10min，直至產生所需的染色強度。

2.13 用水沖洗5min。

2.14 復染（可選）透明、封片。

2.15 光學顯微鏡下觀察。

三、染色結果

陽性染色：在抗原定位處被染成棕黃或棕褐色。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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