| 目錄號 | MM3713-200MG | 售價 | 2153.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 規格 | 2x100mg | 運輸溫度 | 冰袋運輸。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名稱 | 保存溫度 | -20℃密封干燥保存，至少2年穩定。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS號 | 119616-38-5 | 有效期 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 應用 | 訂購數量 |
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
產品簡介:
Sulfo-NHS-Biotin (Sulfosuccinimidyl Biotin)
搜索關鍵詞 Sulfo-NHS-Biotin；Sulfo-NHS；NHS N-羥基琥珀酰亞胺； Sulfo-SMCC；異型雙功能交聯劑；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：6066-82-6；CAS NO：119616-38-5；
產品信息
產品描述 磺基琥珀酰亞胺生物素（Sulfosuccinimidyl Biotin, Sulfo-NHS-Biotin）適用于快速、有效的標記抗體、蛋白和其它含伯胺分子。Sulfo-NHS-Biotin具水溶性、膜非滲透性兩大特征，特別適用于標記細胞表面蛋白。細胞表面生物素化已成為一種重要的工具，用來研究受體和轉運體的表達和調控、區分細胞質膜蛋白和定位在細胞器膜上的蛋白，以及極化上皮細胞的膜蛋白分布，等等。由于Sulfo-NHS-Biotin容易溶于極性溶液，琥珀酰亞胺環上的磺酸鈉基團使其帶電荷從而不能穿透細胞膜。只要細胞維持完整性，則僅有暴露在細胞表面的伯胺才能與其反應，從而將蛋白生物素化。
水不溶性版的Sulfo-NHS-Biotin是NHS-Biotin（Cat#：MM3705），是廣泛使用的生物素化試劑，兩者的工作原理相同，：在生理至弱堿性緩沖液（pH 7-9）中，NHS-Biotin與伯胺（-NH2）反應形成穩定的酰胺鍵。蛋白（包括：抗體）通常含幾種可作為標記靶標的伯胺，包括賴氨酸殘基的側鏈和每條多肽的N末端。我司提供幾種不同的生物素-NHS酯，具有不同的物理特性和臂長，包括：NHS-LC-Biotin、Sulfo-NHS-LC-Biotin。
產品特性
保存與運輸方法 保存：-20℃密封干燥保存，至少2年穩定。 運輸：冰袋運輸。
注意事項 1） 1 Sulfo-NHS-Biotin對濕度敏感，需置于-20℃密封干燥保存。避免處理產品過程中受潮，務必開蓋前將本品平衡至室溫。 2） 務必于使用前在溶解粉末，由于NHS酯官能團非常容易水化，從而失去反應性。因此，不要配制用來保存的儲存液，丟棄任何未用完的溶液。
3） 避免使用含伯胺的緩沖液（比如：Tris、甘氨酸），這些成分會競爭性排擠目的反應。如有必要，通過透析或脫鹽的方式來更換成不含伯胺的反應緩沖液比如：PBS。
4） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟（溶液內生物素化蛋白） 1. 計算 生物素標記率取決于蛋白上氨基分布、蛋白濃度和試劑用量。與高濃度蛋白參與的反應相比較，低濃度蛋白參與的反應需要更高摩爾過量的生物素試劑，以達到相同的標記水平。使用20倍摩爾過量生物素試劑來標記1-10mg/ml抗體（體積：0.5-2ml）的得率，是每個抗體上標記4-6個生物素基團。使用50倍摩爾過量生物素試劑標記50-200μg抗體（0.2-0.7ml）的得率，是每個抗體上標記1-3個生物素基團。需調整Sulfo-NHS-Biotin與蛋白的摩爾比率來獲取理想的插入率。
A．計算加入反應體系所需生物素試劑（如：Sulfo-NHS-Biotin）的毫摩爾（millimoles）（20倍摩爾過量）
B．計算加入反應體系得到10mM生物素試劑（如：Sulfo-NHS-Biotin）所需的微升量（μl，microliters）
2. 生物素標記反應 2.1 從冰箱取出生物素試劑（如：Sulfo-NHS-Biotin），開蓋前平衡至室溫。 2.2 根據1計算所得，準備溶于PBS的蛋白溶液。 2.3 使用前，配制10mM生物素試劑（如：Sulfo-NHS-Biotin）。 2.4 加入適量體積的10mM生物素試劑（如：Sulfo-NHS-Biotin）到蛋白溶液。 2.5 冰上孵育2h或室溫孵育30min。
2.6 此時蛋白標記完成，溶液內雖有過量未反應和水解的生物素試劑，但通常情況下，此時標記好的蛋白可以進行后續的ELISA或WB實驗。一旦確認好標記蛋白的功能，再通過脫鹽或透析的方法來純化標記蛋白。
操作步驟（生物素化細胞表面蛋白） 1. 用預冷PBS（pH 8.0）清洗細胞三次，以去除任何含胺培養基和分泌蛋白。 2. 用PBS（pH 8.0）重懸細胞使其濃度為~25×106細胞/ml。 3. 按照1ml細胞懸液加入1mg Sulfo-NHS-Biotin（得到~2mM生物素試劑）?；?，按照1ml細胞懸液加入200μl 10mM生物素試劑。 4. 室溫孵育30min?！咀⒁狻浚?℃孵育可能減低生物素試劑的內在化反應。 5. 用PBS（pH 8.0）+100mM甘氨酸清洗細胞三次以淬滅和去除過剩的生物素試劑和副產物。
相關產品
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
